蛍光顕微鏡および細胞イメージング

顕微鏡検査は、組織の構造、細胞の構造とダイナミクス、および分子機能を理解する上で中心的な役割を果たします。 蛍光顕微鏡は、細胞や組織に関する空間的および位相的情報を決定するために日常的に使用されています。 洗練されたレーザー走査顕微鏡機器、超高感度デジタルカメラ、および特殊な蛍光プローブにより、分子レベルまでリアルタイムで細胞イベントを視覚化することができます。

使用中の蛍光顕微鏡

蛍光顕微鏡および細胞イメージング共有リソースは、定量的、マルチスケール、およびマルチモーダル蛍光イメージングのための最先端の機器とソフトウェアを利用できるようにすることで、がん研究の卓越性を向上させます。

がん研究の卓越性の向上

ニューロン画像蛍光顕微鏡および細胞イメージング共有リソースは、基礎研究者および医師の研究者がサンプルを画像化し、次のような注目度の高い記事を公開するのに役立ちます。

  • 癌、免疫、感染、代謝、神経、血管の疾患の細胞および分子メカニズムを解明する
  • 細胞および患者サンプルの治療効果を評価する
  • 細胞ベースのアッセイで新しいナノテクノロジーをテストする
  • 組織の形態と病理の変化を定量的に測定する

蛍光顕微鏡および細胞イメージング共有リソースは、UNM研究者に、複数の蛍光および透過光顕微鏡技術のための最先端の機器へのアクセスを提供します。

  • レーザー走査型単光子および多光子顕微鏡とハイパースペクトルイメージングシステムにより、組織化学的染色と蛍光標識の同時可視化と定量化が可能になります
  • 全反射蛍光(TIRF)、単一粒子追跡(SPT)、および単一分子局在化顕微鏡(SMLM)アプリケーションにより、動的な生細胞イベントを定量化し、光の回折限界未満の分解能を実現します。
  • レシオメトリックイメージングにより、細胞シグナル伝達に応じたカルシウムおよびその他のイオン濃度のリアルタイム変化の定量化が可能になります 

蛍光顕微鏡および細胞イメージング共有リソースには、以下を提供するリソーススタッフがいます。 調査員:

  • 実験計画と標本準備に関する専門家の相談 
  • トレーニング
  • 有料のイメージング
  • 継続的な支援

ダイアン・リドケ博士; ファカルティディレクター

病理学科
2325カミノ・デ・サラード、CRF203A
UNM総合がんセンター
ニューメキシコ州アルバカーキ87131
電話番号:(505)272-8375

ダイアン・リドケ博士にメール

Michael Paffett、PhD; 技術指導者

2325カミノ・デ・サラード、CRF201A
UNM総合がんセンター
ニューメキシコ州アルバカーキ87131
Phone: +505-272-1437-XNUMX

パフェット博士にメール

キース・リドケ博士; 特別顧問

210 Yale Blvd NE、2218
物理学と天文学の学際的な科学の建物
ニューメキシコ州アルバカーキ87106
電話番号:(505)277-2616

キース・リドケ博士にメール

この共有リソースの使用を認めるには、出版物に以下を含めてください。

この研究は、UNM包括的がんセンターサポート助成金NCI P30CA118100によって部分的にサポートされ、蛍光顕微鏡および細胞イメージングの共有リソースを利用しました。

出版後、私たちの記録のためにあなたの再版またはカバー画像のXNUMXつを私たちに送ってください。

計装

場所:CRF219

システムの詳細

  • Asylum 83D XYZ ピエゾ スキャン ステージを備えたカスタム オリンパス IX3 倒立顕微鏡
  • Excelitas Turbo マルチスペクトル LED (広視野) およびハロゲン ランプ (明視野)  
  • 10X/0.3NA、20X/0.7NA、100X/1.4NA油浸対物レンズ
  • オリンパス XM10 モノクロ CCD カメラ 
  • アサイラム MFP オリジン AFM ヘッドは、生物学的製剤の移動範囲が拡張されています
  • AFM コン​​トロール用のアサイラム リサーチ ソフトウェア
  • 光学顕微鏡制御用オリンパス cellSens ソフ​​トウェア
  • 生細胞/組織を扱うためのバイオヒーター
  • 数量が続く間提供されるトレーニングプローブ!
  • AFM 互換ディッシュ: WillCo カバーボトムチャンバー (Ted Pella cat # 14025-20) および BD Falcon (#351006) ポリスチレン培養ディッシュ
  • 高解像度スキャン用の原子的に平坦な表面 (雲母または HOPG) は、Ted Pella.com で見つけることができます - サポートについてはお問い合わせください。

可能なアプリケーション

  • 交互接触 (AC) モード、別名タッピングモード、ドライまたはウェットプレップでのナノメートルスケールイメージング用
  • 接触モード ドライまたはウェットプレップでの機械力測定 (弾性係数、接着力、くぼみ、力マッピング) 

場所:CRF216

顕微鏡の詳細

  • XY電動ステージを備えたライカDMi8倒立顕微鏡
  • メタルハライド蛍光灯&ハロゲン透過ランプ
  • 10X、20Xオイル、25X水、63XウォーターDICおよび63XオイルDICの目標
  • PA-GFP、DAPI、CFP、YFP、FITC、ローダミン、およびCy5様フルオロフォアのレーザー励起
  • 調整可能でパルス化された白色光レーザー:470〜670 nm
  • 405つの追加レーザー:458 nmレーザーダイオードとマルチアルゴン(477、488、514、XNUMX nmライン)
  • 2つの検出器:2つのハイブリッドスペクトル検出器*(HyD); 1つのスペクトルSMD ** HyD、1つの標準スペクトルPMTおよびXNUMXつの送信PMT(外部)
  • ガルボZステージ
  • レゾナンススキャナー
  • ピコハープ300蛍光寿命顕微鏡(FLIM)モジュール
  • LASX取得ソフトウェア
  • SymphoTime64(PicoQuant)FLIMソフトウェア
  • ホイヘンスデコンボリューションソフトウェア
  • 生細胞イメージング用東海ヒットステージトップインキュベーター

* HyDは、GAsP光電陰極とアバランシェフォトダイオードを利用した特殊な検出器です。

**単一分子検出器(SMD)

可能なアプリケーション

  • #1.5カバースリップ付きの標準スライドに取り付けられた固定試験片
  • 生細胞検体(LabTekII#1.5マルチウェルまたは35 mm(#1.5)カバー底部)
  • FLIM FRET(固定または生細胞)
  • FRETアクセプターブリーチ(修正済み)
  • FRETセンシタイズドエミッション(生細胞)
  • FRAP(生細胞)
  • 3D取得(Zスタック)とタイムラプスイメージング
  • マルチスペクトルアンミキシング
  • 大面積、多次元タイルスキャン
  • 画像復元処理による超解像(〜130nm)

場所:CRF226

顕微鏡の詳細

  • ZeissAxioObserver倒立顕微鏡XY電動ステージ付き
  • メタルハライド蛍光灯&ハロゲン透過ランプ
  • 10倍、20倍、40倍のオイル、63倍のオイル、63倍の水浸対物レンズ
  • DICは10倍、20倍、40倍、63倍の対物レンズで利用可能
  • PA-GFP、DAPI、CFP、YFP、FITC、ローダミン、およびCy5様フルオロフォアのレーザー励起
  • 405つの固体レーザー:488 nm、561 nm、640 nm、XNUMX nm
  • チャネルおよびスペクトル検出– GaAsPPMT検出器
  • チャネルモードで利用可能な3つのチャネルでの同時検出
  • XY解像度を1.7倍に向上させるAiryscanアレイ検出器
  • 透過光検出器
  • 生細胞インキュベーションシステム:温度、湿度、CO2制御
  • ZenBlue画像取得ソフトウェア

可能なアプリケーション

  • #1.5カバースリップ付きの標準スライドに取り付けられた固定試験片
  • 生細胞検体(LabTekII#1.5マルチウェルまたは35 mm(#1.5)カバー底部)
  • FRETアクセプターブリーチ(修正済み)
  • FRETセンシタイズドエミッション(生細胞)
  • FRAP(生細胞)
  • 3D取得(Zスタック)とタイムラプスイメージング
  • マルチスペクトルアンミキシング
  • 大面積、多次元タイルスキャン
  • 画像復元処理による超解像(〜130nm)

場所:CRF226

顕微鏡の詳細

  • ピエゾZインサートを備えたASI電動XYステージを備えたカスタムオリンパスIX83倒立顕微鏡。
  • Excelitas TurboマルチスペクトルLED(広視野)およびLumencor白色LED(明視野)  
  • 20x / 0.8NAオイル、60x / 1.5NAオイルTIRF、60x / 1.2NA水、および100x /1.4NAオイル対物レンズ
  • 60倍および100倍の光学系に対応したDIC。
  • 時間的に正確なカメラと励起の同期のためのオリンパスリアルタイムコントローラー
  • 独立したペントレーション深さのための4レーザーラインMITICOTIRFイルミネーター
  • TIRF用の4つの個別のレーザーライン:405nm(100mW); 488nm(100mW); 561nm(100mW)および640nm(140mW)
  • 直接確率光学再構成顕微鏡(dSTORM)、光活性化局在顕微鏡(PALM)、高傾斜層流光学(HILO)シートイメージングが可能
  • Hamamatsu FusionsCMOSカメラとGemininiW-Viewイメージスプリッターにより、2色同時生細胞取得が可能です。
  • 非常に高速なワンショットまたは連続オートフォーカス機能のための非光破壊IRZDC2オートフォーカス 
  • 短期生細胞用途向けのBiopTechs客観的ヒーター
  • オリンパスcellSensDimension画像取得ソフトウェア

可能なアプリケーション

  • #1.5Hカバースリップ付きの固定試験片
  • 生細胞検体(LabTekII#1.5Hマルチウェルまたは35 mm(#1.5H)カバー底部)
  • 3D取得(Zスタック)とタイムラプスイメージング
  • 特定のアプリケーションには、生細胞TIRF単一分子検出、HILO、2D dSTORM、またはPALMが含まれます。 
  • HuygensLocalizerが提供するGPU対応の後処理

カメラの場所:CRF218

顕微鏡の詳細

  • 倒立オリンパスIX-71倒立顕微鏡
  • 水銀蛍光灯とハロゲン透過灯
  • モノクロメータ– 350nm〜670nmの励起範囲
  • レーザー:405nm、488nm、520nmおよび642nm
  • 20x、60x H2O、100xオイル、150xオイルTIRF目標
  • 量子ドット、DAPI、FITC、およびRhod様フルオロフォア、Fura-2、Indo-1用の蛍光フィルター
  • AndorIQ画像取得ソフトウェア
  • CO2、熱、湿度を備えた客観的ヒーターおよび病理学デバイス生細胞インキュベーションシステム
  • XYZ電動ステージ
  • Andor iXonEM-CCDカメラ
  • オプティスプリット(デュアル)イメージスプリッター

可能なアプリケーション

  • スライドに取り付けられた固定試験片
  • 客観的ウォーマーによる生細胞イメージング
  • 単一粒子追跡
  • 全反射蛍光(TIRF)
  • レシオメトリックイメージング(二重励起/単一発光または単一励起二重発光)
  • 培養中の生細胞
  • 広視野蛍光–モノクロメーターで可能な多くのフルオロフォア
  • Zスタックと時系列

カメラの場所:CRF224

顕微鏡の詳細

  • AxioPlanMOT直立顕微鏡
  • メタルハライド蛍光灯&ハロゲン透過ランプ
  • 10倍、20倍、40倍のオイル、63倍のオイル目標
  • NuanceカメラおよびNuanceスペクトルカメラとソフトウェアで使用するためのDAPI、FITC、ローダミン、Cy5ロングパスフィルター
  • 電動ノーズピース、Zステージ、フィルタータレット、シャッターで簡単に操作できます。

可能なアプリケーション

  • スライドに取り付けられた固定試験片
  • 広視野蛍光– DAPI、FITC、Rhod、およびCy5のようなフルオロフォアで標識された標本
  • ブライトフィールド– H&E、DAB、ギムザなど。
  • ニュアンススペクトルカメラを使用して、密接に重なり合うフルオロフォア、組織化学的染色を分離し、自家蛍光を区別し、標識を定量化することができます

カメラの場所:CRF212

顕微鏡の詳細 

  • ZeissAxioObserver倒立蛍光顕微鏡
  • 浜松ORCAFlash4.0v2 sCMOSモノクロカメラ(フル解像度100x2048で2048fps)
  • メタルハライド蛍光灯&ハロゲン透過ランプ
  • 10x、20x、63xDICオイル、および100xオイルの目標
  • 10倍および20倍の対物レンズの位相差
  • 蛍光フィルターセットには、DAPI、FITC、ローダミン/ TRITC / Cy3、テキサスレッドおよびCy5が含まれます。
  • 63倍の対物レンズで利用可能なDIC
  • 対物レンズヒーター(63倍の水対物レンズ)oZスタッキング用の電動ノーズピース
  • マルチポジション画像取得用の電動XYステージ(固定または生細胞タイムラプスイメージング)
  • SlideBook6画像取得ソフトウェア

可能なアプリケーション 

  • スライドに取り付けられた固定試験片
  • カバースリップディッシュ内の生細胞/客観的ヒーターによる加熱
  • 63倍の対物レンズを備えたDIC(非共焦点)、蛍光との融合または単独
  • Zスタック、モンタージュ、および時系列イメージング

カメラの場所:CRF226

顕微鏡の詳細

  • AxioSkop 2MOT直立顕微鏡
  • 4x、10x、20x、40x、40xオイルおよび63xオイル
  • 10倍および20倍の対物レンズの位相差
  • AxioCamHRデジタルカラーカメラ
  • ZeissAxioVision画像取得ソフトウェア
  • 電動Zステージ

可能なアプリケーション

  • 一般的な組織病理学のためにスライドに取り付けられた固定標本
  • ブライトフィールド– H&E、DAB、ギムザなど。

CRF224およびCRF226にあります

本ソフトウェア

  • ホイヘンスデコンボリューションサイエンティフィックボリュームイメージング(1)
  • スライドブック(1)
  • StereoInvestigator(1)
  • Neurolucida(1)
  • LASX(ライカ共焦点)(1)
  • IQTL(台風スキャナー分析)(1)
  • 禅(2)  
  • LSM510(2)
  • ニュアンススペクトルイメージングソフトウェア(2)

分析オプション

  • 共同ローカリゼーション
  • デコンボリューション
  • スペクトルアンミキシング
  • 強度分析
  • 形態学的分析
  • 3Dレンダリング
  • オブジェクトカウント
  • 粒子追跡
  • 出版の準備

CRF214にあります

Typhoon FLA 7000は、次のような生体分子イメージングアプリケーション向けの高速で用途の広いレーザースキャナーです。

  • 放射性同位体ラベルの高感度で定量的な測定
  • 化学蛍光ウエスタンブロット
  • 単一蛍光(可視励起)
  • 比色染色の文書化(例、クマシーブルーおよび銀染色ゲル)

CRF214にあります

Li-Cor Odessey Fcは、以下を含む生体分子イメージングアプリケーション向けの近赤外線スキャナー(680nmおよび740nm)です。

  • 化学発光ウエスタンブロットの高感度で定量的な測定
  • 比色染色の文書化(例、クマシーブルーおよび銀染色ゲル)

顕微鏡サービスには以下が含まれます

  • 実験計画と標本準備に関する専門家の相談
  • ユーザートレーニング
  • 助成金申請のためのオペレーター支援イメージングと予備データの取得
  • 新しい機器、テクノロジー、アプリケーションの最新情報をユーザーに通知する年次オープンハウス
  • 大学院生および光学および機器機能に関するフェロー向けの顕微鏡コース
  • 新規ユーザーに標本準備の実践的なトレーニングを提供する年次ワークショップ

FasLGFP RestingAcquisition_20201113_165
RBL細胞における基底FasL-GFP活性発現の全反射蛍光(TIRF)顕微鏡

顕微鏡サービスと料金

Zeiss AxioSkop – AxioCamHRカラーカメラ:$ 10 /時間

Zeiss AxioObserver – Hamamatsu ORCA Flash4.0v2 sCMOSモノクロカメラ:$ 18 /時間

Zeiss AxioPlan2 – Nuanceマルチスペクトルカメラ:$ 10 /時間

Nikon TE2000 – Q-Imaging Retiga R3モノクロカメラ:$ 10 /時間

ライカTCSSP8共焦点、単一分子検出/ FLIM:$ 54 /時間

Zeiss LSM 800 AiryScan:$ 50 /時間

単一粒子追跡/蛍光比イメージング(Rm。218):$ 25 /時間

共焦点ステレオロジーシステム(Rm.212): $ 30 /時間

原子間力顕微鏡 (Rm. 219): $30/時間

落射蛍光イメージング:$ 75 /時間

共焦点蛍光イメージング:$ 100 /時間(4時間)

オリンパス顕微鏡とスペクトルイメージング:$ 75 /時間(2-6時間)

すべての画像診断法:$ 105 /時間

施設の資金調達

ニューメキシコ大学と癌センターの蛍光顕微鏡共有リソースは、1999年の開設以来、機器の購入または施設のサポートに対する以下の資金提供を認めています。

現在の資金

NCI 2P30 CA118100(PI Willman、C。)「UNMCancer CenterSupportGrant」9/25 / 05-8 / 31/20

NIGMS 5P50 GM085273(PI Wilson、BS)「細胞シグナル伝達ネットワークの時空間モデリングセンター(STMC)」08/01 / 08-07 / 31/19

STMC P50GM085273:ライカTCS-SP8およびオリンパスiX71の資金援助

過去の計装資金

NCRR 1 S10 RR14668(PI Wandinger-Ness、A。)「健康科学研究のためのZeissLSM510共焦点顕微鏡」04/01 / 00-03 / 31/01

NSF MCB9982161(PI Wandinger-Ness、A。)「後期エンドサイトーシスにおけるRab7とアクセサリータンパク質機能」(生細胞イメージング用の浜松デジタルカメラの購入)04/01 / 00-03 / 31/06

NCRR S10 RR016918(PI Wandinger-Ness、A。)「ライブセルイメージングプロジェクト用のZeiss Axiovert200」08/01 / 02-04 / 01/04

NCRR S10 RR19287(PI Wandinger-Ness、A。)「META検出器と405nmレーザー」04/01 / 04-03 / 31/05

NCRR 1S10RR025540(PI Wandinger-Ness、A.、co-I Lee、R。)「UNMの蛍光顕微鏡コア用の共焦点立体顕微鏡」ARRA 05/01 / 09-03 / 31/10

NSF DGE-0549500(PI Osinski、M。co-I、Oliver Co-PI)「細胞生物学および神経科学のためのナノテクノロジー」(オリンパスIX71の付属品の購入)6/15 / 06-5 / 31/11

Matthews Family Fund(PI Lee、R。)「NuanceSpectral Imaging System、Cri」01年01月09日〜12年31月09日

NIDDK 3R301 DK050141(PI Wandinger-Ness、A。)「多発性嚢胞腎の病理学的メカニズム」510META用のZeissAxio Observerの購入)ARRA管理補足09/30 / 09-09 / 29/11

NCRR P20 RR11830(PI Oliver、J.、co-PI Eaton、P。)「ニューメキシコにおける学際的研究の強化」9/30 / 96 ‑ 9/29/99

NCI R24 CA88339(PI Sklar、L。)「UNM癌研究のための共有リソース」07/01 / 00-06 / 30/05

NCI P20 CA88807(PI Willman、C。)「ニューメキシコ大学がんセンター計画助成金」07/01 / 00-06 / 30/05

1999年の学内資金-現在:437,266ドル

ニューメキシコ大学健康科学センター

ニューメキシコ大学がんセンター

ニューメキシコ大学医学部病理学科